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四環(huán)凍干—螺旋藻的凍干

更新時(shí)間:2023-09-21 點(diǎn)擊次數(shù):1550

螺旋藻的凍干


東北大學(xué)的彭潤玲博士進(jìn)行了螺旋藻的凍干研究。螺旋藻是一種具有完整細(xì)胞的微藻,是目前所發(fā)現(xiàn)的優(yōu)秀的蛋白質(zhì)保健藥品源之一,其內(nèi)含有多種對(duì)提高人體免疫功能有效的生理活性成分,其中γ亞麻酸含量是已知生物中含量最高的,具有重要的保健功能,可作為治療多種疾病的輔助藥物。螺旋藻細(xì)胞表面及細(xì)胞體內(nèi)含有大量水分,其有效成分多為熱敏性物質(zhì),同時(shí)對(duì)氧也很敏感,因而干燥方法直接影響其干燥質(zhì)量的好壞。目前較多采用的干燥方法有自然干燥、玻璃房溫室曬干、熱風(fēng)循環(huán)烘箱干燥、噴霧干燥等,這些干燥方法干燥溫度較高,導(dǎo)致蛋白質(zhì)在高溫時(shí)變性。研究螺旋藻的凍干,以提高其干燥品質(zhì),保持其干燥后的營養(yǎng)成分,并提供保存螺旋藻藻種的新方法,對(duì)于螺旋藻的應(yīng)用具有重要意義。彭潤玲博士的研究,關(guān)注螺旋藻形態(tài)結(jié)構(gòu)的變化,從降低干燥過程中的細(xì)胞損傷,提高螺旋藻干燥質(zhì)量的角度出發(fā),探索螺旋藻的凍干工藝參數(shù)。




用DSC測定螺旋藻的共晶點(diǎn)



實(shí)驗(yàn)前將其用去離子水在 低速大容量離心機(jī)中清洗,得含水量為 93.91%螺旋藻。用差示掃描量熱儀在 N2氣氛下,以5.0K/min 的速率從18℃冷卻到-60℃,再以5.0K/min 的速率從-60℃升溫到 20℃,得含水量為 93.91%螺旋藻的 DSC曲線如圖6-6 所示。

圖片

分析圖 6-6 得螺旋藻共晶點(diǎn)溫度約為-16℃,熔融點(diǎn)溫度約為-1.5℃,凝固潛熱和熔化潛熱分別為 260J/g 和-268J/g。




螺旋藻凍干保護(hù)劑


糖類保護(hù)劑對(duì)微生物細(xì)胞的凍干脫水具有顯著的保護(hù)作用,主要以“水置換的作用"達(dá)到保護(hù)膜系統(tǒng)的完整性;天然保護(hù)劑,如脫脂牛奶、血清、卵黃可以防止微生物細(xì)胞在預(yù)凍過程中膜脂蛋白分解變性。使用適當(dāng)比例的牛奶和糖類保護(hù)劑可使假絲母菌細(xì)胞的存活率從 0.2%提高到 30%~40%。因此,研究中選脫脂牛奶和聚糖為螺旋藻凍干保護(hù)劑進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)研究。

準(zhǔn)確稱量脫脂奶粉各 10g、5g、2.5g,按比例分別配置成濃度為 20%、10%、5%的脫脂牛奶保護(hù)劑;準(zhǔn)確稱量葡聚糖各 2g、1g、0.5g,按比例分別配置成濃度為 10%、5%、2.5%的葡聚糖保護(hù)劑;螺旋藻培養(yǎng)液 (主要成分為 NaCl,濃度為 0.5mol/L) 和按 1:2例稀釋的稀培養(yǎng)液 (NaCl 濃度 0.25mol/L)。分裝在直徑為 60mm 的玻璃中,各裝 5mL。

分別取 2mL 離心清洗后新鮮螺旋藻放入分裝好的各種保護(hù)劑中,搖勻;將準(zhǔn)備好的各種物料用冰箱預(yù)凍到-30℃,在 GLZ-0.4 冷凍干燥機(jī)上干燥,凍干過程冷阱溫度、擱板溫度、物料內(nèi)部溫度以及干燥室壓力隨時(shí)間的變化如圖 6-7 所示。

凍干后的螺旋藻真空封裝,常溫保存 10 天后,復(fù)水 10min,然后在倒置顯微鏡下觀測其形態(tài)結(jié)構(gòu)。

 6-8 為用脫脂牛奶為保護(hù)劑凍干螺旋藻后的形態(tài)結(jié)構(gòu)。當(dāng)用不同濃度的脫脂牛奶為保護(hù)劑時(shí),對(duì)螺旋藻的細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)都有一定的保護(hù)作用,特別是用濃度 10%的脫脂牛奶為保護(hù)劑時(shí)螺旋藻的螺面不發(fā)生變化,完性好,與新鮮螺旋藻的基木一致,但直徑方向存在縮水。

2.jpg

 6-9 為用葡聚糖為保護(hù)劑凍干螺旋藻后的形態(tài)結(jié)構(gòu)。可以看出,葡聚糖在凍干過程中對(duì)螺旋藻細(xì)胞沒有明顯的保護(hù)作用,不適宜作為螺旋藻的凍干保護(hù)劑。

3.jpg

 6-10 (a) 為純螺旋藻冰箱凍結(jié)凍干后的形態(tài)結(jié)構(gòu)。與新鮮螺旋藻相比直徑方向有明顯的收縮,且破碎嚴(yán)重,完整性差。圖 6-10 (b)為0.5ol/L 的 NaCl培養(yǎng)液作為保護(hù)劑時(shí)螺旋藻凍干后的形態(tài)結(jié)構(gòu),完整性較好。圖 6-10 (c) 為 0.25mol/L 的 NaCI稀培養(yǎng)液作為保護(hù)劑時(shí)螺旋藻凍干后的形態(tài)結(jié)構(gòu),直徑方向的收縮明顯減少,幾乎沒有收縮,與新鮮螺旋藻的差不多,完整性也很好。

4.jpg

通過實(shí)驗(yàn)分析得出,10%脫脂牛奶和稀培養(yǎng)液可作為螺旋藻的凍干保護(hù)劑。



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